Informatii generale
Hepatita C este produsa de un virus (VHC) care infecteaza si afecteaza ficatul. VHC este cauza aparitiei hepatitelor acute in 20% din cazuri, a hepatitelor cronice in 60-70% si a cirozelor si cancerelor hepatice in aproximativ 30% din cazuri.
Virusul hepaticei C, descoperit in anul 1989, face parte din familia Togaviridae, genul Flavivirus si este un virus ARN care se transmite prin contactul direct cu sangele infectat.
In urma efectuarii acestui test este confirmata prezenta anticorpii IgG specifici VHC in probele de ser care au dat rezultate pozitive la testele de screening Anti HCV.
Testul de confirmare permite detectarea anticorpilor aociati cu diferite etape ale infectiei.
Recomandari pentru efectuarea testului
Tinand cont de faptul ca hepatita C este cea mai frecventa cauza a bolilor ronie de ficat, testul pentru depistarea Anti HCV se realizeaza in urmatoarele situatii:
- pentru diagnosticul de infetie acuta sau cronica cu VHC;
- in screeningul produselor de sange si al donatorilor;
- in screeningul prenatal pentru prevenirea infectarii fatului;
- atunci cand se stie ca pacientul a folosit droguri ilegale injectabile;
- in cazul in care pacientii prezinta boli cronice ale ficatului.
Pregatirea pacientului – recoltarea se realizeaza à jeun (pe nemancate)
Specimenul recoltat – sange venos
Recipientul de recoltare – vacuntainer fara anticoagulant cu/fara gel separator
Cantitate recoltata – minim 2 ml ser
Cauze de respingere a probei – specimen intens hemolizat sau contaminat cu bacterii
Prelucrarea specimenului recoltat – serul se separa prin centrifurare in ziua in care a fost recoltat
Stabilitate proba – serul separat este stabil timp 6 zile la temperatura camerei, 7 zile la 2-8°C si timp indelungat la -20°C. Se evita decongelarea-recongelarea repetata.
Metoda – imunoblot
Aceasta metoda presupune separarea a 5 antigene HCV, recombinare purificate, pe baza greutatii moleculare prin electrofaza in gel de poliacrilamida in prezenta de sodium dodecil sulfat si transferarea ulterioara electroforetica a acestora pe o membrana de nitroceluloza.
Cele 5 antigene HCV folosite sunt proteinele non-structurale: NS-3, Helicaza, NS-5-12, NS-4 si proteina structurala Core.
Interpretarea rezultatelor
Valorile pozitive obtinute in urma acestui test confirma prezenta anticorpilor specifici Anti HCV datorati unei infectii acute sau cronice.
Obtinerea unui rezultat echivoc impune repetarea testului la un interval de 1-2 luni pentru stabilirea prezentei sau absentei de anticorpi Anti HCV.
Un rezultat negativ indica absenta anticorpilor specifici Anti HCV si un rezultat fals pozitiv la testele de screening.
Se obtin rezultate fals negative in cazul: persoanelor cu HIV pozitive, a celor cu insuficienta renala, crioglobulinemie mixta esentiala, in caz de congelari si decongelari repetate sau depozitarea prelungira a probelor de sange.
Se obtin rezultate fals pozitive in cazul: bolilor autoimune, poliarterita nodoasa, prezenta unui factor reunatoid, hipergamaglobulinemie, paraproteinemie, transfer pasiv de anticorpi, anticorpi antisuperoxid dismutaza (enzima umana folosita in procesul de clonare).
