Informatii generale

Concentratul leucocitar este un produs sanguin labil, alcatuit din granulocite (care au rolul de a fagocita bacteriile) in suspensie in plasma si este obtinut prin aferaza practicata pe donator unic.

Unele elemente patologice prezente in sangele periferic pot fi detectate mai usor prin prepararea unei fractiuni concentrate a elementelor nucleate sanguine (buffy coat). Atunci cand numarul de celule imature sau elemente celulare anormale este mic, acestea nu pot fi detectate pe frotiul de sange obisnuit, in acest caz concentratul leucocitar avand un rol important in identificarea acestora.

Recomandari pentru determinarea concentratului leucocitar

-         pancitopenia fara o cauza aparenta: detectia de celule imature sau anormale;

-         leucemia leucopenica: detectia de blasti;

-         tablou leucoeritroblastic: identificarea de precursori mieloizi, eritroblasti, fragmente de megakariocite;

-         anemie macrocitara (megaloblastica): identificarea de megaloblasti (precursori eritroizi nucleati) si granulocite hipersegmentate;

-         mielom multiplu: prezenta de plasmocite;

-         hairy cell leukemia: identificarea de celule paroase;

-         atunci cand se suspecteaza prezenta de celule tumorale circulante (limfoame in faza leucemica);

-         prezenta de paraziti sau bacterii intraleucocitare.

Pregatirea pacientului

Recoltarea se realizeaza “à jeun” (pe nemancate) sau postprandial (dupa masa).

Specimenul recoltat – sange venos

Recipientul de recoltare – vacutainer cu K₃-EDTA

Cantitate recoltata – 2 tuburi (cat permite vacuumul)

Cauze de respingere a probei – tub incorect, specimen coagulat sau hemolizat

Prelucrarea specimenului dupa recoltare

Imediat dupa ce au fost recoltate probele, tuburile se aseaza in pozitie verticala intr-un stativ si se lasa la temperatura camereai timp de 2-3 ore pentru ca elementele celulare sanguine sa se separe de pasma sedimentand. Urmatorul pas consta in a aduna cu ajutorul unei pipete plasma supernatanta impreuna cu stratul leuco-trombocitar situat deasupra stratului eritrocitar si o mica partedin stratul eritrocitar.

Plasma astfel colectata se trece intr-o eprubeta si se centrifugheaza timp de 10 minute la 2000 rpm pentru ca leucocitele si trombocitele sa se depuna pe fundul eprubetei. Mai departe, este indepartata plasma supernatanta cu exceptia unei mici cantitati care va servi ca diluant al sedimentului din care se vor intinde frotiurile ce vor fi colorate May-Grunwald-Giemsa[1].

Stabilitate proba

Frotiurile trebuie efectuate cat mai repede dupa recoltare, in primele 2-3 ore. Frotiurile fixate in metanol sunt stabile fara a fi colorate cel putin un an, pastrandu-si aceeasi calitate.

Metoda – examinare microscopica atenta a marginilor si franjurii frotiului unde se dispun adesea precursorii mieloizi (mielocite, promielocite, blasti) si eritoblastii.

Examinarea se face initial la putere mica, cu un obiectiv de 20x, urmand ca apoi frotiul sa fie examinat microscopic cu obiectivul de 100x cu inversie.

Valori de referinta – absenta elementelor celulare anormale

Interpretarea rezultatelor

Pe lamele de concentrat leucocitar pot aparea celule sanguine care nu se regasesc in mod obisnuit in formula leucocitara curenta (de exemplu mielocite, metamielocite). Totodata, trebuie precizat faptul ca prin aceasta metoda nu se pot aprecia cu acuratete morfologia eritrocitara, numarul de trombocite si formula leucocitara. Uneori poate fi observat un numar mai mare de monocite. Totusi frotiurile de concentrat leucocitar efectuate corespunzator sunt reprezntative pentru populatia generala de celule nucleate prezenta in sange.[2]

In cazul cu leucopenie pot fi examinate intr-un timp scurt mai multe celule decat pe frotiul obisnuit.

Identificarea celulelor imature, a celulelor anormale, blasti, celule tumorale circulante sau alte forme mucleate circulante, precum si bacterii sau paraziti interleucocitari, ofera informatii diagnostice importante si poate reduce necesitatea altor teste mai complexe.

Limite si interferente

Prepararea frotiurilor de concentrat leucocitar poate determina distorsiuni celulate, mai ales la nivelul celulelor cu o structura mai fragila.

[2] http://www.synevo.ro/concentrat-leucocitar