CMMH

Cultura si indentificare fungi (cu antifungigrama dupa caz) Email This Page


Informatii generale

Infectiile cu fungi, in special cele determinate de levuri, au inregistrat o crestere semnificativa in ultimii ani. Levurile sunt celule care se inmultesc prin inmugurire, celula mama excluzand o portiune din ea pentru a produce celula fiica.

Fungii se pot imparti in doua categorii:

-         fungi filamentosi – sunt formati din filamente, numite hife, care se intrepatrund si formeaza micelii;

-         fungi dimorfi. Dimorfismul se refera la abilitatea unor fungi de a exista in doua forme: filamentoasa, ce se dezvolta in laborator la 25-30 C si levurica, in tesuturile infectate.

Siturile de izolate a levurilor in functie de zona in care sunt localizate sunt:

Localizare Fungi / levuri
In tegument, folicul pilos, raclat unghial §     Dermatophytes, Candida spp., Malassezia, Trichosporon, Aspergillus spp., Zygomycetes, Cryptococcus neoformans
In derma, tesut subcutanat §     Coccidioides immitis, Blastomyces dermatidis, Sporothrix schenckii, Aspergilus spp. si  la pacientii cu micetoame: Nocardia spp., Streptomyces
In tractul respirator inferior §     Candida spp., Coccidioides immitis, Blastomyces dermatidis, Cryptococcus neoformans, Histoplasma capsulatum;

§     la pacientii imunodeprimati (HIV pozitivi): Aspergillus spp., Zymomycetes, Nocardia asteroides, Pneumocystis carinii

In tractul respirator superior §     Candida spp, Saccharomyces
In tractul gastro-intestinal §     la pacientii imunodeprimati: Candida spp., Aspergillus spp., Zygomycetes
In tractul genitourinar §         Candida spp., Rhodotorula, Saccharomyces, Torulopsis
In endocard §     Candida spp.
In meninge §     Candida spp., Cryptococcus neoformans
In abcesul cerebral §     Candida spp., Aspergillus spp., Nocardia asteroides, Cryptococcus neoformans, Histoplasma capsulatum
In lichidul cefalorahidian §     Candida spp., Histoplasma capsulatum, Cryptococcus neoformans, Coccidioides immitis
In tesutul osos §     Cryptococcus neoformans, Coccidioides immitis, Blastomyces dermatidis
In ochi §     Candida spp., Histoplamsa capsulatum, Aspergillus spp., Cryptococcus neoformans, Zygomycetes
In ureche §     Aspergilus spp
In sinusul nazal §     Aspergillus spp., Fusarium
In plagile arse §     Aspergillus spp., Zygomycetes, Fusarium
In infectiile de cateter intravenos §     Candida spp., malassezia (la nou nascut)
In infectii deseminate §     Histoplasma capsulatum, Blastomyces dermatidis, Coccidioides immitis;

§     la pacienti imunodeprimati: Candida spp., Zygomycetes, Aspergillus spp., Fusarium, Cryptococcus neoformans, Nocardia asteroides.

Metoda de identificare a fungilor

1. Examen microscopic

Din probele prelevate se realizeaza frotiuri Gram pentru evidentierea levurilor in absenta cresterii pe medii de cultura (la pacientii aflati sub tratament antifungic) si preparate proaspete pe lama, lamela din cultura pentru diferentierea anumitor specii de spergillus, Fusarium, Microsporum, Trichophyton, etc.

2. Cultivarea probelor

Cultivarea se face pe mediul Sabouraud Agar cu Chloramfenicol, se incubeaza la o temperatura de 35-37°C (pentru dezvoltarea levurilor sau conversia fungilor dimorfi in levuri) sau la 25-30°C (in cazul fungilor patogeni) timp de 48-72 de ore.

3. Identificarea culturilor

Identificarea se face cu ajutorul unui sistem biochimic standardizat care se bazeaza pe fermentarea a 7 zaharuri si un test enzimatic.

In urma utilizarii acestei metode se pot identifica urmatoarele specii: Candida spp., Cryptococcus spp., Trichosporon spp.,  Saccharomyces cerevisiae, Rhodotorula.

Pentru tulpinile care nu pot fi identificate se foloseste un alt sistem biochimic bazat pe fermentarea a 13 zaharuri si 3 teste enzimatice, care permite identificarea urmatoarelor specii: Candida spp., Cryptococcus spp., Trichosporon spp., Saccharomyces cerevisiae, Geotrichum spp., Prototheca wickerhamii.